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复星长征 T-SPOT的用途是什么 [复制链接]

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发表于 2013-10-14 22:22:09 |只看该作者 |倒序浏览
当提到复星长征 T-SPOT的时候,萦绕在我们心头的问题有,复星长征 T-SPOT是什么?复星长征 T-SPOT用途是什么?复星长征 T-SPOT的检验原理是什么?今天就让我们了解一下复星长征 T-SPOT是什么吧。 复星长征 T-SPOT是用于检测人外周抗凝全血中的结核特异抗原刺激活化的效应T 细胞,仅适用于临床疑似结核病的辅助诊断。  结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主,作为免疫应答的一部分,T 细胞受结核抗原刺激致敏,形成活化的效应T 细胞,包括CD4 和CD8,从全血中单独被分离出来,在体外受特异抗原刺激并被记数。从结核分枝杆菌复合群 (人 、牛型、 非洲 )中选择有用的抗原降低与BCG (卡介苗)和环境分枝杆菌的交叉反应提高特异性。两个单独的抗原模仿 ESAT-6 和 CFP 10,联合应用提高检测灵敏度。 复星长征 T-SPOT.TB 是一种更简单的酶联免疫斑点(ELISPOT)检测方法。ELISPOT 检测是高灵敏度的,在细胞分泌的细胞因子扩散稀释前,其能够立即捕获细胞周围所分泌的细胞因子。这使得ELISPOT 检测更加的灵敏,超过传统的ELISA 实验。复星长征 T-SPOT.TB 被设计出来用于检测结核特异抗原刺激活化的效应T 细胞。T-SPOT.TB 记数每个活化的结核特异效应T 细胞。 那么复星长征 T-SPOT的检验原理是什么呢,通过资料我们了解到,复星长征 T-SPOT的检验原理是。外周血单个核细胞(PBMCs)从全血样本中被分离, 过洗涤排除本底干扰因素。记数 PBMCs,保证有标准的细胞数量用于检测。这可以保证因为免疫系统削弱 (免疫力低下和免疫抑制)而导致T 细胞浓度低的样本也有足够的细胞数加入反应孔检测。与ELISPOT 技术一样的洗涤和记数过 ,提高了检测结核病和结核感染的性能。 抗原和PBMCs一起孵育,刺激所有的致敏T 细胞。分泌的细胞因子被预包被在反应孔膜上的特异抗体捕获,然后细胞和其它不必要的物质 过洗涤被去除。标记二抗,碱性磷酸酶配对的与细胞因子上不同的抗原决定簇结合,在反应孔膜上捕获细胞因子。 过洗涤去除任何未标记的抗体。可溶的底物溶液加入到每个检测孔中,在反应部位被酶分解形成不溶性色素沉淀斑点。每一个斑点代表一个分泌细胞因子的T 细胞,记数斑点数量可以获得外周血中结核致敏的T 细胞数量。 复星长征 T-SPOT,是上海复星长征医学科学有限公司研究的。

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